Le clonage TA est une méthode simple et pratique de sous-clonage des produits de réaction en chaîne de la polymérase (PCR). "TA" est l'abréviation de "thymine" et "adénine". Cette technique de clonage utilise la capacité de la thymine à s'hybrider à l'adénine en présence de ligases. Les enzymes de restriction ne sont pas utilisées, contrairement à la méthode de sous-clonage traditionnelle. Au lieu de cela, les produits PCR sont amplifiés en utilisant des enzymes Taq polymérases.


























La méthode de clonage TA utilise l'activité terminale transférase de certains acides aminés désoxyribonucléiques. p> Un vecteur de clonage linéarisé avec trois surplombs T (3'-T) uniques, appelés un vecteur T, est utilisé pour cloner ce produit de PCR dans un vecteur plasmidique. Le produit de PCR est mélangé avec ce vecteur en grande proportion. L'ADN ligase (T4 ligase) est ajouté au mélange, ce qui permet aux deux produits de s'hybrider et de se joindre.

Avantages et inconvénients

Le clonage TA est une méthode pratique de sous-clonage des produits de PCR dans le vecteur linéarisé, et il est beaucoup plus simple et plus rapide que les méthodes de sous-clonage traditionnelles. Parce que cette méthode n'utilise pas d'enzymes de restriction, les produits sans sites d'enzymes de restriction peuvent être clonés. Un inconvénient est que les kits de clonage TA sont très coûteux et, par conséquent, leur utilisation est limitée. En outre, il n'y a pas de clonage directionnel; donc la probabilité de clonage dans une direction opposée est plus grande.

Kits de clonage TA

Plusieurs fabricants vendent des kits de clonage TA. Certains sont Invitrogen, QIAGEN et Premier Biosoft.