Voici comment cela fonctionne:
1. Réaction: Le réactif DNS, contenant de l'acide 3,5-dinitalicylique, est chauffé en présence d'un sucre réducteur.
2. Réduction: Le sucre réducteur (comme le glucose, le fructose ou le maltose) réduit le DNS de couleur jaune au 3-amino-5-NSA de couleur brune.
3. Formation de couleurs: L'intensité de la couleur brune produite est directement proportionnelle à la concentration du sucre réducteur présent.
4. Mesure: L'absorbance de la solution est mesurée à une longueur d'onde spécifique (généralement 540 nm) à l'aide d'un spectrophotomètre. Cette absorbance est ensuite utilisée pour quantifier la quantité de réduction du sucre présente dans l'échantillon.
Principes clés:
* réaction redox: La réaction entre le DNS et le sucre réducteur est une réaction redox, où le DNS est réduit et le sucre est oxydé.
* test colorimétrique: Le changement de couleur du jaune au brun fournit une indication visuelle de la concentration de sucre réductrice.
* BEAR-LAMBERT LOI: L'absorbance mesurée est directement proportionnelle à la concentration du produit coloré, suivant la loi sur la bière-lame.
Avantages de la méthode DNS:
* simple et peu coûteux: La méthode est relativement simple et utilise des réactifs facilement disponibles.
* Sensibilité élevée: La méthode DNS est suffisamment sensible pour détecter de faibles concentrations de réduction des sucres.
* largement applicable: Il peut être utilisé pour mesurer la réduction des concentrations de sucre dans une variété d'échantillons, notamment des liquides biologiques, des produits alimentaires et des échantillons industriels.
Limites de la méthode DNS:
* Interférence par les sucres non réducteurs: Les sucres non réducteurs comme le saccharose ne réagissent pas avec le DNS.
* spécificité: La méthode n'est pas spécifique pour une seule réduction du sucre. Il mesure la teneur totale en sucre en réduction.
* Sensibilité à la température: La vitesse de réaction est sensible aux variations de température.
Dans l'ensemble, la méthode colorimétrique DNS est une méthode largement utilisée, fiable et pratique pour quantifier la réduction de la teneur en sucre dans divers échantillons. Cependant, ses limites doivent être prises en compte lors de l'interprétation des résultats.
