* Front de solvant: Le solvant agit comme la phase mobile de TLC. Il parcourt la phase stationnaire (plaque TLC) transportant les acides aminés avec. Si les taches sont immergées, le solvant saturera immédiatement l'ensemble, conduisant à une mauvaise séparation . Comme les acides aminés seront dissous et transportés sur toute la longueur de la plaque plutôt que d'être séparés en fonction de leurs affinités individuelles pour la phase stationnaire.
* Contamination: La submergence des taches peut conduire à la dissolution et contamination des acides aminés dans le solvant. Cela peut créer des résultats inexacts et rendre difficile la visualisation des spots.
* distorsion: La submergence des taches peut déformer la forme des spots, ce qui rend difficile de mesurer avec précision leurs valeurs RF (la distance parcourue par le spot par rapport à la distance parcourue par le front du solvant). Cela peut conduire à une identification inexacte des acides aminés.
Procédure appropriée:
Dans TLC, les échantillons d'acides aminés sont repérés au-dessus du niveau de solvant sur la plaque TLC. La plaque est ensuite placée dans une chambre en développement contenant un système de solvant. Le front de solvant monte dans l'assiette, transportant les acides aminés avec lui, ce qui entraîne leur séparation en fonction de leurs propriétés.
En résumé, garder les taches d'acide aminé au-dessus du niveau de solvant dans TLC assure une séparation appropriée, empêche la contamination et permet une identification précise.
