1. Chromatographie d'adsorption:
* Principe: Cette méthode repose sur les différentes affinités des composants pour la phase stationnaire (généralement un adsorbant solide comme le gel de silice ou l'alumine). Composants qui se lient plus fortement à la phase stationnaire se déplacent plus lentement dans la colonne.
* Exemples:
* chromatographie sur la colonne: Une colonne verticale emballée avec la phase stationnaire. Le mélange est appliqué en haut et la phase mobile (liquide ou gaz) traverse, séparant les composants.
* Chromatographie en couche mince (TLC): Une fine couche d'adsorbant est recouverte d'une plaque. Le mélange est repéré en bas et la phase mobile remonte la plaque par action capillaire, séparant les composants.
2. Chromatographie de partition:
* Principe: Cette méthode exploite les différentes solubilités de composants dans deux phases non miscibles (la phase stationnaire et la phase mobile). Les composants plus solubles dans la phase stationnaire se déplaceront plus lentement.
* Exemples:
* Chromatographie en phase gazeuse (GC): La phase stationnaire est un liquide non volatile recouvert d'un support solide, et la phase mobile est un gaz inerte. Ceci est utilisé pour séparer les composés volatils.
* Chromatographie liquide haute performance (HPLC): Utilise une pompe à haute pression pour forcer la phase mobile à travers une colonne emballée contenant la phase stationnaire (généralement un liquide). Cela convient pour séparer une large gamme de composés.
3. Chromatographie d'échange d'ions:
* Principe: Cette méthode utilise des groupes fonctionnels chargés sur la phase stationnaire pour lier les ions de charge opposée du mélange. Différents ions avec différentes affinités pour la phase stationnaire sont séparés.
* Exemples:
* chromatographie d'échange de cations: Utilise une phase stationnaire chargée négativement pour lier les cations.
* chromatographie d'échange d'anions: Utilise une phase stationnaire chargée positivement pour lier les anions.
4. Chromatographie de taille-exclusion (SEC):
* Principe: Cette méthode sépare les molécules en fonction de leur taille. La phase stationnaire a des pores de tailles spécifiques. Des molécules plus grandes ne peuvent pas entrer dans les pores et passer à travers la colonne plus rapidement, tandis que les molécules plus petites peuvent pénétrer dans les pores et se déplacer plus lentement.
* Exemples:
* Chromatographie sur la filtration du gel: Utilise une matrice de gel comme phase stationnaire.
* Chromatographie sur la perméation du gel (GPC): Utilise un polymère poreux comme phase stationnaire.
5. Chromatographie d'affinité:
* Principe: Cette méthode utilise une interaction très spécifique entre un composant dans le mélange et un ligand immobilisé sur la phase stationnaire. Cela permet une séparation hautement sélective.
* Exemples:
* Chromatographie par immunoaffinité: Utilise des anticorps comme ligands pour se lier et séparer les protéines spécifiques.
* Chromatographie sur l'affinité métallique: Utilise des ions métalliques comme ligands pour se lier et séparer les protéines avec des sites de liaison aux métaux spécifiques.
Remarque: Le choix spécifique de la méthode de chromatographie dépend de la nature du mélange, de la séparation souhaitée et des propriétés des composés. Chaque méthode présente ses propres avantages et inconvénients, et le choix nécessite souvent une attention particulière.
