1. Précipitation des acides nucléiques : L'acétate de sodium, lorsqu'il est ajouté à une solution d'ADN dans des conditions contrôlées de température et de pH, contribue à la précipitation des acides nucléiques (ADN et ARN) de la solution. Il réduit la solubilité de l’ADN en neutralisant les charges négatives présentes sur le squelette phosphate de la molécule d’ADN. Cela permet à l’ADN de former des sels insolubles, qui peuvent être facilement séparés des autres composants du lysat cellulaire.
2. Élimination des contaminants : L'acétate de sodium aide à éliminer les contaminants, tels que les protéines, les débris cellulaires et autres impuretés, lors de l'isolement de l'ADN. Lorsque de l'acétate de sodium est ajouté, ces contaminants restent en solution, tandis que l'ADN précipité peut être collecté par centrifugation.
3. Contrôle du pH : L'acétate de sodium agit comme un tampon pour maintenir le pH approprié pendant l'isolement de l'ADN. Le pH optimal pour la précipitation de l’ADN se situe généralement entre 5,0 et 5,2. L'acétate de sodium aide à maintenir cette plage de pH, ce qui est crucial pour une précipitation efficace de l'ADN.
4. Concentration élevée en sel : La concentration élevée en sel créée par l'acétate de sodium dans la solution facilite la formation de complexes ADN-protéine. Ces complexes sont essentiels à la séparation efficace de l’ADN des autres composants cellulaires.
5. Optimisation de la récupération de l'ADN : L'acétate de sodium contribue à l'optimisation des rendements de récupération de l'ADN en réduisant les interactions non spécifiques entre l'ADN et les contaminants. Une concentration appropriée en sel permet de garantir que l'ADN est précipité de manière sélective, minimisant ainsi la perte d'ADN pendant le processus d'isolement.
6. Compatibilité avec les étapes suivantes : L'acétate de sodium est compatible avec les étapes ultérieures d'isolement et de purification de l'ADN. L'ADN précipité peut être facilement lavé, redissous dans des tampons appropriés et traité ultérieurement pour des applications en aval telles que la PCR, les réactions enzymatiques ou le séquençage.
Dans l’ensemble, l’acétate de sodium joue un rôle essentiel dans la précipitation de l’ADN des lysats cellulaires lors de l’isolement de l’ADN. Il contribue à la séparation efficace de l’ADN des impuretés, en maintenant des conditions de pH optimales et en facilitant le traitement en aval de l’ADN isolé.
