1. Préparation des échantillons :
- Des échantillons de sang ou d'autres tissus sont prélevés sur l'individu.
- Les globules blancs sont isolés de l'échantillon.
- Les cellules sont cultivées en laboratoire pour stimuler la division cellulaire.
2. Récolte et fixation de cellules :
- Au stade approprié de la division cellulaire (métaphase), les cellules sont récoltées et traitées avec une solution hypotonique pour les gonfler.
- Les cellules gonflées sont ensuite fixées avec un fixateur, généralement un mélange de produits chimiques comme le méthanol et l'acide acétique, pour préserver les structures cellulaires.
3. Préparation des diapositives :
- Les cellules fixées sont déposées sur des lames de microscope et étalées pour créer une monocouche de chromosomes.
- Les lames sont séchées à l'air ou chauffées pour améliorer l'adhérence des chromosomes à la surface du verre.
4. Coloration :
- Une technique de coloration, comme le Giemsa ou la trypsine-Giemsa, est utilisée pour colorer les chromosomes.
- Les taches se lient à des régions spécifiques des chromosomes, permettant l'identification de motifs de bandes caractéristiques.
5. Modèles de bandes :
- Les motifs de bandes sur les chromosomes sont uniques pour chaque paire de chromosomes et fournissent une représentation visuelle de la structure et de l'organisation des chromosomes.
- Ces modèles sont utilisés pour l'identification et l'analyse des chromosomes.
6. Caryotypage :
- Les chromosomes colorés sont disposés et organisés dans un format standard en fonction de leur taille, de leur forme et de leurs motifs de bandes.
- Cet arrangement organisé crée un caryotype, qui est essentiellement une représentation photographique du complément chromosomique d'un individu.
7. Analyse chromosomique :
- Les caryotypes sont examinés au microscope par des cytogénéticiens ou d'autres professionnels qualifiés.
- Ils analysent le nombre, la structure et les éventuelles anomalies des chromosomes.
- Des variations numériques ou structurelles spécifiques (par exemple, duplications, délétions, translocations) peuvent être détectées et étudiées plus en détail.
8. Marqueurs génétiques et FISH :
- Des techniques spécialisées telles que l'hybridation fluorescente in situ (FISH) peuvent être utilisées pour approfondir l'étude de locus génétiques spécifiques ou identifier des réarrangements chromosomiques.
- FISH implique l'utilisation de sondes fluorescentes qui se lient à des séquences d'ADN spécifiques, permettant la visualisation de régions chromosomiques ou de gènes d'intérêt spécifiques.
9. Interprétation et rapport :
- Sur la base de l'analyse du caryotype et des éventuelles techniques supplémentaires employées, un rapport cytogénétique est généré.
- Le rapport décrit les résultats chromosomiques, identifie toute anomalie ou variation chromosomique et fournit des informations pertinentes pour le conseil génétique, le diagnostic et la gestion des troubles génétiques.
Il est important de noter que l’analyse du caryotype est un domaine spécialisé et que l’interprétation des anomalies chromosomiques nécessite une expertise et des connaissances en génétique et cytogénétique humaines.
