1. Analyse morphologique :Cela consiste à examiner la lignée cellulaire au microscope pour observer sa forme, sa taille et ses caractéristiques de croissance. Si l’analyse morphologique peut être utile pour identifier les caractéristiques générales d’une lignée cellulaire, elle n’est pas toujours suffisante pour une authentification définitive.
2. Immunophénotypage :Cette méthode utilise des anticorps pour détecter la présence ou l’absence de marqueurs de surface spécifiques ou de protéines intracellulaires caractéristiques d’un type cellulaire particulier. L'immunophénotypage peut être réalisé à l'aide de techniques telles que la cytométrie en flux ou l'immunocytochimie.
3. Caryotypage :Cette technique consiste à analyser le nombre de chromosomes et la structure d'une lignée cellulaire. Le caryotypage peut identifier des anomalies ou des changements chromosomiques pouvant indiquer une contamination ou une identification erronée.
4. Empreintes digitales ADN :Cette méthode consiste à analyser les modèles d'ADN uniques d'une lignée cellulaire à l'aide de techniques telles que le profilage de répétitions en tandem courtes (STR) ou l'analyse du polymorphisme mononucléotidique (SNP). Les empreintes génétiques peuvent fournir un niveau élevé de discrimination et sont largement utilisées pour l’authentification des lignées cellulaires.
5. PCR spécifique à l'espèce :Cette méthode utilise la réaction en chaîne par polymérase (PCR) pour amplifier des séquences d'ADN spécifiques propres à l'espèce d'origine de la lignée cellulaire. La PCR spécifique à une espèce peut être utilisée pour détecter une contamination croisée ou une identification erronée de lignées cellulaires.
6. Analyse des isoenzymes :Cette technique consiste à analyser la mobilité électrophorétique des isoenzymes, qui sont des variantes d'enzymes qui diffèrent par leur structure moléculaire et leur fonction. L’analyse des isoenzymes peut être utilisée pour identifier la contamination d’une lignée cellulaire ou une identification erronée basée sur des différences dans les profils d’isoenzymes.
7. Tests de mycoplasmes :Les mycoplasmes sont un type de bactérie qui peut contaminer les cultures cellulaires et affecter leur comportement et les résultats expérimentaux. Les tests mycoplasmiques sont essentiels pour garantir que les lignées cellulaires sont exemptes de contamination par les mycoplasmes.
Il est important de noter que le choix de la méthode d'authentification dépend de la lignée cellulaire spécifique et du niveau d'authentification requis. Certaines lignées cellulaires peuvent nécessiter plusieurs méthodes d’authentification pour garantir une identification et un contrôle qualité fiables. De plus, une documentation et une tenue de registres appropriées du processus d'authentification sont essentielles pour maintenir l'intégrité des lignées cellulaires et garantir la reproductibilité de la recherche.
