1. Interactions hydrophobes:
* Les protéines sont généralement solubles dans l'eau en raison de leurs groupes hydrophiles (qui aiment l'eau), qui forment des liaisons hydrogène avec des molécules d'eau.
* Cependant, ils contiennent également des groupes hydrophobes (sans eau) qui ont tendance à se regrouper.
2. Influence du sulfate d'ammonium:
* Lorsque du sulfate d'ammonium est ajouté à une solution de protéines, il interagit avec les molécules d'eau, les éliminant efficacement des groupes hydrophiles de la protéine.
* Cette perturbation des coquilles d'hydratation autour de la protéine expose les groupes hydrophobes.
3. Agrégation et précipitations:
* À mesure que la concentration de sulfate d'ammonium augmente, les groupes hydrophobes sur différentes molécules de protéines deviennent plus exposés et interagissent entre eux, conduisant à l'agrégation.
* Finalement, ces agrégats deviennent suffisamment grands pour devenir insolubles et précipiter hors de la solution.
Facteurs affectant les précipitations:
* Concentration des protéines: Des concentrations de protéines plus élevées nécessitent des concentrations de sulfate d'ammonium plus élevées pour les précipitations.
* Type de protéine: Différentes protéines ont différents degrés d'hydrophobicité, conduisant à différentes sensibilités aux précipitations de sulfate d'ammonium.
* pH: Le pH de la solution peut influencer la charge de la protéine et son interaction avec le sulfate d'ammonium.
* Température: Des températures plus élevées améliorent généralement la solubilité des protéines, nécessitant des concentrations plus élevées de sulfate d'ammonium pour les précipitations.
Applications des précipitations de sulfate d'ammonium:
* Purification des protéines: C'est une technique courante pour concentrer et purifier partiellement les protéines de mélanges complexes.
* cristallisation: Le sulfate d'ammonium peut être utilisé pour favoriser la cristallisation des protéines, ce qui est crucial pour les études structurelles.
Avantages de l'utilisation du sulfate d'ammonium:
* Relativement peu coûteux et facilement disponible.
* Généralement non dénaturant aux protéines, ce qui signifie qu'il ne détruise pas leur structure native.
* Permet une précipitation sélective basée sur les propriétés des protéines.
Considérations:
* Il est crucial d'optimiser la concentration de sulfate d'ammonium pour chaque protéine spécifique et le résultat souhaité.
* Le précipité peut contenir d'autres molécules en plus de la protéine cible, nécessitant d'autres étapes de purification.
* Certaines protéines peuvent être sensibles aux concentrations élevées de sel.
En conclusion, les précipitations de sulfate d'ammonium sont une technique précieuse pour séparer et purifier les protéines en exploitant les différences dans leurs interactions hydrophobes et leur solubilité en présence de concentrations élevées de sel.
