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) sont pas utilisé pour induire une compétence artificielle dans les bactéries. Au lieu de cela, le chlorure de calcium (CACl
Voici pourquoi:
* Faciliter l'absorption d'ADN: Cacl 2 Le traitement rend les cellules bactériennes plus perméables à l'ADN, leur permettant de prendre l'ADN exogène plus efficacement. Le mécanisme implique:
* déstabilisation de la membrane cellulaire: CA
* Blindage de l'ADN: Le CA
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chargé positivement Les ions neutralisent les charges négatives sur l'ADN, l'empêchant d'être repoussé par la membrane cellulaire chargée négativement.
* Faciliter la liaison de l'ADN: Cacl 2 Le traitement peut également favoriser la liaison de l'ADN à la surface des cellules bactériennes, facilitant l'absorption.
* Choc de chaleur: Après cacl 2 Traitement, les bactéries sont soumises à un bref choc thermique (généralement 42 ° C pendant 1 à 2 minutes). Ce choc thermique perturbe encore la membrane cellulaire et permet à l'ADN d'entrer dans la cellule.
Pourquoi pas les ions calcium seuls?
Bien que les ions calcium jouent un rôle dans le mécanisme, les utiliser seuls ne seraient pas efficaces. Le chlorure de calcium fournit la concentration nécessaire des ions calcium et aide également à maintenir l'équilibre osmotique de la cellule.
en résumé:
Le chlorure de calcium est utilisé pour la compétence artificielle dans les bactéries car elle facilite l'absorption de l'ADN en déstabilisant la membrane cellulaire, en protégeant l'ADN de la répulsion et en favorisant la liaison de l'ADN. L'étape de choc thermique améliore encore l'entrée de l'ADN.