Le principal colorant utilisé dans la technique de coloration acido-résistante de Ziehl-Neelsen, couramment utilisée pour détecter la présence de bactéries acido-résistantes telles que Mycobacterium tuberculosis, est la fuchsine phénique. Cependant, une contre-coloration est également utilisée dans cette procédure pour fournir un contraste et améliorer la visibilité des organismes non acido-résistants. Le contre-colorant généralement utilisé dans la méthode Ziehl-Neelsen est le bleu de méthylène.

Voici les fonctions du contre-colorant en coloration acido-résistante :

1. Coloration différentielle :La contre-coloration aide à différencier les bactéries acido-résistantes des bactéries non acido-résistantes. Les bactéries acido-résistantes conservent la coloration primaire (fuchsine phénique) même après un lavage approfondi avec de l'acide-alcool en raison de leur composition unique de paroi cellulaire riche en acides mycoliques. En revanche, les bactéries non acido-résistantes perdent facilement la coloration primaire au cours de cette étape.

2. Contraste de couleur : la contre-coloration confère une couleur contrastée aux organismes non acido-résistants, leur permettant de se distinguer facilement des bactéries acido-résistantes rouges ou roses. Le bleu de méthylène est couramment utilisé comme contre-colorant car il colore efficacement en bleu les bactéries non acidorésistantes, créant ainsi une distinction visuelle claire.

3. Visualisation améliorée :En fournissant un contraste de couleur, la contre-coloration améliore la visibilité globale des micro-organismes non acido-résistants dans la préparation colorée. Cela facilite l’identification et l’observation des différents types de bactéries présentes dans l’échantillon.

4. Coloration de fond :La contre-coloration contribue également à fournir une couleur de fond à la lame, ce qui facilite la localisation et la différenciation des cellules bactériennes individuelles.

5. Informations supplémentaires :Dans certains cas, la contre-coloration peut fournir des informations supplémentaires sur les caractéristiques des bactéries non acidorésistantes. Par exemple, certaines contre-colorations peuvent révéler la présence de composants ou de structures cellulaires spécifiques pouvant faciliter une identification et une classification plus poussées.

Dans l’ensemble, la contre-coloration de la technique de coloration acido-résistante de Ziehl-Neelsen contribue à la visualisation, à la différenciation et à l’identification efficaces des bactéries acido-résistantes en fournissant un contraste et en mettant en évidence les micro-organismes non acido-résistants dans l’échantillon.