Les tests de sensibilité aux antimicrobiens, également appelés tests de sensibilité aux antimicrobiens, sont une procédure de laboratoire utilisée pour déterminer l'efficacité des agents antimicrobiens contre des micro-organismes spécifiques. Cette procédure est cruciale pour guider la sélection appropriée des antibiotiques dans le traitement des infections. Bien qu'il existe différentes méthodes pour effectuer des tests de sensibilité aux antimicrobiens, une technique populaire connue pour sa simplicité et ses résultats rapides est la méthode de diffusion sur disque Kirby-Bauer. Cette méthode consiste à tester des isolats bactériens contre différents agents antimicrobiens en plaçant des disques imprégnés d'antibiotiques sur une plaque de gélose contenant la culture bactérienne. Les étapes suivantes fournissent un aperçu concis de la méthode de diffusion sur disque Kirby-Bauer :

Préparation de l'inoculum :

1. Cultivez l’isolat bactérien dans un milieu de culture en bouillon approprié pendant une durée spécifiée pour obtenir un inoculum standardisé.

2. Ajustez la turbidité du bouillon de culture pour qu'elle corresponde à une norme prédéfinie, garantissant ainsi une densité constante de cellules bactériennes.

Inoculation de la plaque de gélose :

1. À l’aide d’un écouvillon stérile, étalez uniformément l’inoculum standardisé sur la surface d’une boîte de gélose contenant un milieu de croissance approprié.

Application des disques antibiotiques :

1. Sélectionnez les disques antibiotiques appropriés en fonction des agents antimicrobiens testés.

2. À l’aide d’une pince stérile, placez soigneusement les disques d’antibiotiques sur la plaque de gélose inoculée.

3. Assurez-vous que les disques sont uniformément espacés et ne touchent pas les uns les autres ni les bords de la plaque.

Incuber la plaque :

1. Retournez la plaque de gélose et incubez-la à la température et aux conditions appropriées requises pour la croissance de l’isolat bactérien. Cela implique généralement une incubation pendant la nuit.

Mesurer et interpréter les résultats :

1. Après la période d’incubation, examinez la plaque de gélose à la recherche de zones d’inhibition entourant les disques d’antibiotiques.

2. Les zones d'inhibition représentent les zones où la croissance bactérienne est inhibée en raison de l'activité antimicrobienne de l'antibiotique.

3. Mesurer les diamètres des zones d'inhibition à l'aide d'une règle ou d'un outil normé.

4. Reportez-vous aux critères ou lignes directrices d'interprétation établis (tels que ceux fournis par CLSI ou EUCAST) pour déterminer la sensibilité ou la résistance de l'isolat bactérien à chaque antibiotique en fonction des diamètres de zone.

Rapport des résultats :

1. Résumez les résultats en catégorisant l’isolat bactérien comme sensible (S), intermédiaire (I) ou résistant (R) à chaque antibiotique en fonction des critères d’interprétation.

2. Fournir le profil de sensibilité de l’isolat bactérien, qui montre le profil de sensibilité ou de résistance aux antibiotiques testés.

Applications et avantages :

1. La méthode de diffusion sur disque Kirby-Bauer offre un moyen simple et rentable d’évaluer la sensibilité aux antimicrobiens en milieu clinique.

2. Il permet aux cliniciens de prendre des décisions éclairées concernant la sélection des antibiotiques, d’optimiser les stratégies de traitement et de minimiser le risque de développement d’une résistance aux antimicrobiens.

Malgré sa simplicité, la méthode de diffusion sur disque Kirby-Bauer présente certaines limitations et exceptions, et il est important de suivre des protocoles standardisés et de consulter des directives et des ressources supplémentaires pour une interprétation et un rapport précis des résultats.