Un microbiologiste utilise la coloration à la chitine pour voir clairement les champignons au microscope. Les champignons utilisent la chitine comme matériau structurel dans leurs parois cellulaires, de sorte que la tache montre bien la paroi cellulaire. Le colorant bleu de lactophénol est la tache la plus commune pour les champignons. Le phénol tue les micro-organismes et empêche les enzymes fongiques de décomposer la cellule. Le colorant bleu de coton tourne le bleu de chitine. La coloration de la chitine est une procédure relativement simple avec des matériaux peu coûteux. Vous pouvez soit fabriquer votre propre colorant ou acheter des colorants préparés commercialement.
Préparer une solution de lactophénol coton bleu. Peser 0,05 grammes de colorant bleu de coton en utilisant une balance sensible. Mélanger le colorant avec 20 millilitres d'eau distillée dans un tube à essai et laisser reposer pendant une nuit.
Enfiler des gants avant la fin de la préparation des taches le jour suivant. Placer 20 ml d'acide lactique dans un bécher et mélanger avec 20 g de cristaux de phénol. Remuer jusqu'à ce que le mélange soit dissous. Ajouter 40 ml de glycérol et mélanger. Ensuite, filtrer la solution de coton bleu à travers un morceau de papier filtre dans le bécher et bien mélanger.
Sinon, utiliser une source de teinture préparée commercialement. Conserver la tache à température ambiante.
Étiqueter une lame de microscope avec le nom ou le numéro d'identification de l'échantillon. Utilisez un compte-gouttes stérile pour mettre une seule goutte d'un échantillon d'eau sur le centre de la lame de microscope. Pour un échantillon sec, placez une seule goutte de solution d'alcool à 70% sur la lame, puis utilisez une boucle stérile pour mélanger l'échantillon sec dans l'alcool.
Utilisez un compte-gouttes propre pour transférer deux gouttes de lactophénol tache bleue de coton sur le centre de la glissière. Si vous utilisez de l'alcool à 70 pour cent sur la lame, faites-le avant que l'alcool ne s'évapore de la lame.
Touchez un bord de la lamelle de microscope sur un bord de la préparation d'échantillon humide. Laissez le glissement tomber doucement sur la préparation de l'échantillon, en veillant à ne pas emprisonner de bulles d'air sous la lame. L'échantillon coloré est maintenant prêt à être examiné au microscope.
