Une enzyme est une protéine qui catalyse (augmente le taux de) réactions chimiques. La température optimale de la plupart des enzymes, ou la température à laquelle les enzymes facilitent le mieux les réactions, est comprise entre 35 et 40 degrés Celsius. L'augmentation de la température dans cette fenêtre augmente la vitesse de réaction, car elle excite les molécules et augmente la vitesse à laquelle les enzymes /réactifs entrent en collision et réagissent pour fabriquer le produit. Cependant, augmenter trop la température peut dénaturer l'enzyme et l'empêcher de fonctionner.
Déterminer la température optimale de l'enzyme en chauffant la réaction par des quantités infinitésimales et en prenant de petits échantillons de la réaction, pour déterminer quand le taux maximum de produit produit se produit.
Sélectionnez une méthode. Déterminez comment vous allez mesurer la concentration de votre produit à différents moments de l'expérience. Par exemple, vous pouvez mesurer la concentration de nombreux produits en utilisant un spectrophotomètre et en calculant la concentration à partir de l'absorbance, ou en mesurant la fluorescence et en calculant la concentration à partir de la fluorescence.
Configurez votre expérience. Placez vos réactifs et enzyme dans un petit récipient avec un couvercle, comme un flacon à scintillation. La réaction commencera. Placez le flacon de scintillation dans un bécher plus grand d'eau à température ambiante. Placez le bécher sur une plaque chauffante. Placez un thermomètre à l'intérieur du bécher. Cela vous permet de mesurer la température de la réaction à différents points.
Prélevez un échantillon de 100 microlitres de la réaction à température ambiante, environ 25 degrés Celsius. Allumez la plaque chauffante. À différentes températures entre 30 et 40 degrés Celsius (30,5, 31, 31,5, etc.), prélevez des échantillons de 100 microlitres de votre réaction.
Déterminez la concentration de votre produit à chaque température. Lorsque la température dépasse 40 degrés Celsius, vous verrez une diminution de la vitesse à laquelle le substrat est transformé en produit, car l'enzyme est dénaturée. Le point auquel le produit est produit à la vitesse maximale est le point où la température est optimale.
