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  • Technologie et instrument de détection PCR numérique sur puce développés

    Fig. Diagramme de flux de travail du système de détection nano-dLAMP. Crédit :SIBET

    Une équipe conjointe de Chine a récemment fourni une multiplexage, méthode de détection quantitative pour le diagnostic précoce et la thérapie ciblée des néoplasmes myéloprolifératifs, un type de tumeur hématologique chronique qui s'accompagne d'une insuffisance médullaire ou d'une leucémie.

    L'équipe, dirigé par Zhou Lianqun du Suzhou Institute of Biomedical Engineering and Technology de l'Académie chinoise des sciences et GUAN Ming de l'hôpital Huashan, a établi une plate-forme d'amplification isotherme médiée par une boucle numérique assistée par nanoparticules (nano-dLAMP) pour l'analyse des néoplasmes myéloprolifératifs.

    Réaction en chaîne par polymérase numérique (PCR numérique, dPCR), une haute sensibilité, technologie de détection d'acides nucléiques quantitative absolue et à haute tolérance, joue un rôle important dans une variété de domaines d'application, comme la détection de mutations rares, variation du nombre de copies, biopsie liquide, analyse unicellulaire, détection génétiquement modifiée, test de charge virale, et analyse quantitative microbiologique.

    Dans cette étude, les chercheurs ont fabriqué des puces à puces avec quatre partitions physiques pour la détection simultanée de la calréticuline de type 1, calréticuline type 2, mutations janus kinase 2 V617F et un gène de référence interne.

    Ils ont ensuite utilisé des additifs PCR et des nanoparticules pour rendre l'amplification isotherme à médiation par boucle (LAMP) traditionnelle adaptée à une amplification à l'échelle du nanolitre.

    Les résultats suggèrent que les nanoparticules pourraient améliorer les performances d'amplification du nanolitre LAMP.

    La détection quantitative des principaux marqueurs moléculaires des néoplasmes myéloprolifératifs pourrait être effectuée simultanément dans une puce à quatre puces à quatre partitions en une heure. L'accord entre la plate-forme développée et le Quantstudio 3D commercial était élevé à 99%.

    Cette précision, rapide, multiplex, et la plate-forme nano-dLAMP peu coûteuse pourrait être un outil prometteur pour le diagnostic clinique à l'avenir, selon les chercheurs.

    Les résultats de l'étude ont été publiés dans Sensors &Actuators B:Chemical intitulé "Establishment of Scalable Nanoliter Digital LAMP Technology for the Quantitative Detection of Multiple Myeloproliferative neoplasm molemarks".

    Le groupe de Zhou se concentre sur le domaine des biocapteurs depuis plus de 10 ans, et a accumulé une base solide dans le développement de méthodes de biocapteurs, conception et traitement de biopuces, et le développement d'instruments bioscientifiques.

    Dans la recherche et développement PCR numérique, méthode dPCR sur puce (cdPCR) avec une stabilité d'isolement élevée, une bonne uniformité de température et une vitesse de détection rapide ont été développées. Une série de progrès ont été obtenus sur la méthode de détection, ébrécher, réactif et instrument de cdPCR.


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