miniLM. Crédit :L'Institut Francis Crick
Aucun microscope ne peut imager tous les aspects d'un échantillon en même temps et l'utilisation de deux ou plusieurs méthodes d'imagerie pour étudier un échantillon - l'imagerie corrélative - est donc courante.
Lucy Collinson dirige la plate-forme technologique scientifique de microscopie électronique au Francis Crick Institute. La plateforme apporte une expertise en imagerie des structures des molécules, cellules et tissus à haute résolution.
L'imagerie corrélative a permis aux chercheurs de Crick travaillant en collaboration avec l'équipe de Lucy d'étudier comment les synapses se forment dans le cerveau, les premiers processus de production de protéines de coagulation sanguine et la façon dont les particules de VIH sont libérées des cellules infectées.
Maintenant, en collaborant avec des fabricants d'instruments, L'équipe de Lucy a poussé la technologie encore plus loin.
Ils ont développé une nouvelle façon d'imager les structures qui surmonte les limites de la technologie existante. Ils l'ont fait en plaçant un microscope à lumière fluorescente dans un microscope électronique.
"L'un des principaux défis de l'imagerie corrélative est de préparer l'échantillon de manière à ce qu'il puisse être imagé à la fois au microscope optique et au microscope électronique, " explique Lucy. " Nous avons développé un protocole qui préserve les protéines fluorescentes qui s'illuminent au microscope optique, tout en colorant et en enrobant l'échantillon afin que les cellules puissent être vues au microscope électronique et résister à l'environnement sous vide. Cela nous permet d'imager les échantillons dans une seule machine - un microscope optique et électronique intégré. »
ultraLM. Crédit :L'Institut Francis Crick
L'imagerie d'un échantillon de cette manière révèle la fonction dynamique des protéines (révélée par le microscope optique) dans le contexte de la structure cellulaire et tissulaire (montrée en détail par le microscope électronique).
Martin Jones et Lizzy Brama, deux physiciens au sein du groupe Microscopie Prototypage, conçu et construit un 'miniLM, ' similaire dans son concept aux systèmes d'endoscopie par fluorescence utilisés en chirurgie guidée par fluorescence.
Ils ont également conçu un deuxième système, l'ultraLM, ' qui facilite la préparation des échantillons des cellules fluorescentes incorporées dans la résine dans l'outil ultramicrotome qui coupe les échantillons en sections.
Des travaux d'aménagement ont eu lieu au Crick, avec l'idée qu'il devrait être mis à la disposition de la communauté en tant que technologie open source. L'objectif est que toute installation ayant les compétences nécessaires pour construire et moderniser ces microscopes à fluorescence miniaturisés dans leurs propres microscopes électroniques. Il est également prévu de concéder sous licence la technologie à des fabricants commerciaux.
