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    Techniques d'isolement pour une série de plaques

    Bien qu'elles ne puissent pas être vues à l'œil nu, les bactéries sont partout. Ils existent dans la nourriture, le sol, l'eau, les surfaces dans nos maisons, et dans et sur nos corps. Les bactéries existent généralement dans des populations mixtes. L'isolement d'une bactérie spécifique d'autres espèces bactériennes dans un échantillon donné permet aux microbiologistes d'étudier sa structure et sa fonction, caractéristiques utilisées dans son identification. Les microbiologistes isolent fréquemment les bactéries en utilisant l'une des techniques de la plaque de strie.

    Outils

    Une boucle d'inoculation est utilisée pour transférer les micro-organismes. Il se compose d'un fil de nichrome ou de platine avec une petite boucle circulaire à une extrémité. L'autre extrémité est droite et glisse dans une poignée. Des boucles d'inoculation jetables en plastique sont également disponibles. Les bactéries ne peuvent être isolées que si elles se développent. Les microbiologistes cultivent des bactéries pour l'isolement des plaques dans des boîtes de Pétri rondes et peu profondes remplies d'un milieu solide appelé agar. L'agar imite l'environnement dans lequel les bactéries se développent naturellement. Les plats remplis de médias sont stériles et fermés pour empêcher la croissance des organismes non désirés. Pendant l'isolement de la plaque à stries, la boucle d'inoculation est stérilisée à plusieurs reprises dans la flamme d'un bec Bunsen.

    Principe

    La technique des stries est la méthode la plus populaire pour isoler des bactéries spécifiques d'un échantillon contenant mélange de micro-organismes. La technique dilue essentiellement le nombre d'organismes et réduit leur densité. Il permet aux microbiologistes de distinguer et d'isoler les colonies bactériennes individuelles. Une colonie est un groupe visible de bactéries. Toutes les bactéries d'une même colonie proviennent de la même cellule bactérienne. Par conséquent, les colonies individuelles sont des colonies "pures". La colonie pure est transférée dans une autre plaque pour produire une culture pure constituée d'un type de bactérie.

    Procédure

    Lorsqu'elle est bien faite, l'isolement de la plaque de striçage dilue un échantillon et permet à des cellules bactériennes individuelles de se développer en colonies isolées. Un microbiologiste commence par stériliser la boucle d'inoculation dans une flamme. Elle refroidit la boucle en la touchant à l'agar, puis plonge la boucle dans l'échantillon et l'étale d'avant en arrière pour couvrir une section de la plaque. Elle stérilise la boucle, la refroidit et inocule une seconde section adjacente de la plaque en faisant glisser la boucle à travers la première section plusieurs fois et en couvrant la seconde section en utilisant un mouvement en zigzag. Cela ramasse un petit nombre de bactéries de la première section et les transfère à la deuxième section. Le nombre de répétitions de cette procédure de base dépend de la méthode de la plaque à stries utilisée. Malgré la méthode, l'échantillon original est utilisé pour inoculer la première section de la plaque seulement.

    Méthodes

    Les méthodes de la plaque à stries varient en fonction du nombre de sections d'agar striées. La méthode T-streak utilise trois sections: la moitié supérieure et deux sections inférieures de taille égale. L'inoculum initial est placé dans la moitié supérieure de la plaque. Les bactéries sont traînées de la section supérieure à l'une des sections inférieures, puis de cette section inférieure à l'autre. Dans la méthode du quadrant, quatre sections de taille égale sont striées. Le procédé à stries continues implique typiquement l'inoculation de la moitié supérieure de la plaque, la rotation de 180 degrés, et l'inoculation de l'autre moitié de la plaque sans stériliser la boucle ou tirer les bactéries de la section précédente.

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