Isoler les bactéries du sol est une première étape importante dans de nombreuses expériences de microbiologie. Une fois qu'elles sont isolées, les bactéries peuvent être analysées davantage pour déterminer des choses, telles que leurs espèces et leur fonction dans l'environnement du sol. Même une infime quantité de sol peut contenir des millions de bactéries, ce qui nécessite de diluer un échantillon de sol avant d'isoler les bactéries de l'échantillon.

Mesurer 100 ml. Verser dans la bouteille stérile de l'eau distillée et l'ajouter à la bouteille stérile.

Peser 1 g de l'échantillon de sol et l'ajouter à la bouteille d'eau distillée. Fermer hermétiquement la bouteille et agiter pour bien mélanger la solution.

Étiqueter les éprouvettes stériles "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" et "10 ^ - 6. " Ajouter 9 ml d'eau distillée à chacun des tubes, en utilisant l'une des pipettes.

Transférer 1 ml de la solution dans la bouteille dans le tube étiqueté "10 ^ -3", en utilisant une nouvelle pipette. Boucher le tube et agiter doucement jusqu'à ce que la solution soit bien mélangée.

Transférer 1 ml de la solution dans le tube à essai "10 ^ -3" dans le tube "10 ^ -4" avec une nouvelle pipette. Boucher le tube "10 ^ -4" et agiter pour mélanger. Répétez cette méthode pour transférer la solution du tube "10 ^ -4" au tube "10 ^ -5" puis du tube "10 ^ -5" au tube "10 ^ -6".

Planche trois échantillons chacun des tubes "10 ^ -4", "10 ^ -5" et "10 ^ -6". Utilisez une nouvelle pipette pour transférer 1 ml de solution du tube dans une plaque de Petri. Ajouter environ 15 ml d'agar nutritif à la plaque; Ensuite, mettre le couvercle sur la plaque et agiter doucement pour que l'agar recouvre le fond de la plaque.

Faire une plaque de contrôle en plaçant 1 ml d'eau distillée dans une boîte de Pétri, en utilisant une nouvelle pipette. Ajouter de l'agar; Mettez le couvercle et tourbillonnez la plaque.

Laissez les plaques de Pétri à la verticale jusqu'à ce que l'agar se soit mis en place. Puis inverser les plaques et les incuber - soit dans un incubateur ou à température ambiante - aussi peu que 24 heures et jusqu'à cinq jours.

Retirer les plaques de l'incubateur après la durée d'incubation désirée. Comptez les colonies bactériennes sur des plaques contenant environ 30 à 300 colonies. Utilisez un marqueur permanent pour marquer les colonies que vous avez déjà comptées afin d'éviter de compter deux fois les mêmes colonies.

Divisez le nombre de colonies comptées par la dilution - "10 ^ -4", "10 ^ -5 "ou" 10 ^ -6 "de la solution du sol pour chaque plaque. Trouver le nombre de bactéries cultivables dans le gramme de sol d'origine en faisant la moyenne des résultats de chaque plaque dénombrable.

TL; DR (Trop long; Ne pas lire)

Suivre les techniques de laboratoire aseptique tout au long la procédure.

Avertissement

Pour éviter la contamination et l'infection possible par les bactéries, assurez-vous de jeter correctement toutes les plaques de Petri, les solutions de sol et les pipettes.

Cette procédure seulement mesure les bactéries cultivables. Selon l'Université Cornell, entre 90 et 99 pour cent des bactéries du sol ne poussent pas sur gélose nutritive.