La microbiologie est l'étude des micro-organismes: des formes de vie unicellulaires microscopiques ou à peine visibles telles que les bactéries, les archées, les protozoaires et certains champignons, et même des plantes, des animaux et des champignons multicellulaires extrêmement petits. Les microbiologistes étudient également des phénomènes non-organiques réalistes tels que les virus, les prions, les viroïdes et les virions. "Microbe" est un terme fourre-tout pour toutes ces entités. Le dénombrement en microbiologie est la détermination du nombre de microbes viables individuels dans un échantillon; quatre techniques de base sont possibles.
Comptage des cultures
Une mesure directe du dénombrement microbien est le dénombrement sur plaque standard, également appelé dénombrement viable. Pour ce compte, vous cultivez un échantillon en le diluant, en le plaçant sur des plaques de milieu de culture et en les incubant pendant une durée déterminée. Vous comptez ensuite le nombre de colonies et utilisez ce nombre pour déduire le nombre d'origine de microbes dans l'échantillon. Techniquement parlant, le nombre de plaques ne donne pas le nombre de microbes individuels, mais plutôt des "unités formant colonie", car vous ne pouvez pas savoir avec certitude si chaque colonie provient en fait d'un seul microbe ou d'un petit groupe de microbes. . Cependant, ces dénombrements sont considérés comme très précis pour estimer le nombre de microbes dans les échantillons originaux. Les inconvénients sont que ce test prend beaucoup de temps et d'espace et nécessite un équipement spécialisé qui doit être préparé correctement.
Comptages individuels
Les dénombrements microscopiques directs, également appelés dénombrements totaux de cellules, sont une autre forme d'énumération directe. Vous divisez d'abord un échantillon en plusieurs chambres de taille égale. Ensuite, vous déterminez le nombre moyen de microbes par chambre en comptant tout ou partie au microscope. Enfin, vous utilisez cette moyenne pour calculer le nombre dans l'unité d'origine. L'inconvénient majeur des dénombrements microscopiques directs est qu'il est difficile de distinguer les microbes vivants des microbes morts, de sorte que cette méthode peut ne pas donner une énumération viable précise.
Rayons de lumière, nuages de microbes
Les tests de turbidité sont des formes d'énumération indirecte. La turbidité est la turbidité d'un liquide. Dans la mesure turbidimétrique, vous mettez un échantillon en solution, mesurez la nébulosité de la nouvelle solution en la projetant à l'aide d'un spectrophotomètre, puis estimez le nombre de microbes vivants qu'il faudrait pour produire le niveau de nébulosité observé. L'inconvénient ici est que quelqu'un doit avoir déjà effectué de nombreux comptages de plaques standard du microbe en question afin de faire des solutions d'échantillonnage de turbidité variable, de sorte que vous avez une norme pour mesurer votre échantillon actuel. Vous devez également prendre garde à ne pas trop concentrer votre échantillon, car un comptage turbidimétrique n'est précis que si aucun microbe dans l'échantillon n'en bloque d'autres. Dans une comparaison de turbidité visuelle, vous comparez la turbidité de votre échantillon avec la turbidité d'une unité de même taille et de nombre microbien connu, et estimez une énumération basée sur cette comparaison.
Résultats indirects
Deux autres formes du dénombrement indirect sont la détermination de la masse et la mesure de l'activité microbienne. Pour une énumération de détermination de masse, vous pesez la quantité de matière biologique dans votre échantillon, comparez ce poids à une courbe standard pour les dénombrements microbiens connus et estimez le nombre microbien d'origine à partir de cette comparaison. Pour une mesure de l'activité microbienne, vous mesurez la quantité d'un produit biologique dans votre échantillon, comme les déchets métaboliques, puis comparez cela à une courbe standard pour les dénombrements connus et estimez votre dénombrement à partir de cette comparaison.
