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    Comment identifier l'API Enterobacter Aerogenes 20E

    Enterobacter aerogenes et d'autres espèces d'Enterobacteriaceae sont faciles à identifier en utilisant le kit de test API-20E. Ce kit, fabriqué par bioMeriuex Inc., comprend 20 mini-tubes ou puits pour le test. Le test consiste à inoculer une suspension bactérienne pure dans les puits d'essai et à lire les réactions colorées qui se produisent. L'identification repose sur la conversion des résultats de ces réactions de couleur en un code à sept chiffres connu sous le nom d'index de profil analytique. L'appariement de ce code avec la base de données du fabricant fournit une identification de l'organisme.

    Isolez l'organisme que vous souhaitez identifier sur un milieu de culture spécifique aux Enterobacteriaceae. Utiliser le kit de test API 20E uniquement avec des cultures pures et non directement sur des échantillons de cultures mixtes.

    Ouvrir une ampoule contenant 5 ml de chlorure de sodium à 0,85% de milieu. Retirer une seule colonie d'une plaque d'isolement âgée de 18 à 24 heures avec une pipette, et l'ajouter dans l'ampoule. Mélanger pour obtenir une suspension homogène. Utilisez cette suspension dès que vous avez fini de la préparer.

    Installez une boîte d'incubation composée de puits alvéolés dans un bac muni d'un couvercle. Ouvrez la boîte et ajoutez 5 ml d'eau déminéralisée ou distillée dans les puits du plateau. Déballer la bandelette fournie dans le kit de test API 20E et la placer dans la boîte d'incubation.

    Remplir le tube et la cupule des cupules marquées "GEL", "VP" et "CIT" avec la suspension avoir preparé. Dans les puits restants, remplissez la suspension bactérienne dans le tube mais pas la cupule. Ajouter de l'huile minérale dans les puits marqués "ADH", "ODC", "LDC", "URE" et "H2S" pour créer un environnement anaérobie.

    Couvrir la boîte d'incubation avec le couvercle, et incuber à un température entre 34 et 38 degrés Celsius pendant 18 à 24 heures.

    Observez les puits et notez les réactions sur la feuille de résultats. Si un minimum de trois tests sont positifs, procéder aux réactions de couleur en utilisant les solutions de test chimiques ou les réactifs fournis avec le kit. Ajouter une goutte de réactif TDA dans le puits marqué "TDA" et une goutte de chacun des réactifs VP1 et VP2 dans bien marqué "VP". Si moins de trois tests sont positifs, incuber les bandelettes pendant 24 heures supplémentaires avant d'ajouter ces réactifs.

    Observer les changements de couleur produits dans les puits. Une couleur brun rougeâtre dans TDA indique une réaction positive. Attendez 10 minutes après l'ajout des réactifs du kit dans VP1 et VP2. Considérez une couleur rouge ou rose comme positive et une couleur rose pâle apparaissant après 10 minutes comme négatif.

    Ajoutez une seule goutte de réactif JAMES du kit de test au puits marqué «IND». Considérez une réaction rosée dans toute la cupule comme une réaction positive.

    Effectuez le test d'oxydase tel que spécifié par le fabricant du kit, et enregistrez ses résultats avec les résultats des 20 tests précédents.

    Utilisez la table de lecture fournie avec le kit de test pour attribuer des valeurs pour les réactions observées dans chacun des puits de test. Ajoutez ces valeurs comme indiqué pour obtenir le numéro de profil à sept chiffres.

    Introduisez ce numéro de profil à sept chiffres dans la base de données du fabricant du kit à l'aide d'un téléphone à clavier. Attendez de recevoir l'identification fournie par la base de données. Si le numéro de profil ne fournit pas de résultats spécifiques, effectuez les tests supplémentaires spécifiés par le fabricant du kit.

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